分光光度計,是將成分復(fù)雜的光,分解為光譜線的科學(xué)儀器,通過對這些光譜線進(jìn)行成分分析進(jìn)而確定測量樣品的成分。
近年來,紫外及可見光分光光度分析已得到廣泛的應(yīng)用,它不僅可以用于物質(zhì)的鑒定及結(jié)構(gòu)分析,而且還可以用于某些物質(zhì)含量的測定。
分光光譜技術(shù)可用于:
通過測定某種物質(zhì)吸收或發(fā)射光譜來確定該物質(zhì)的組成.
通過測量適當(dāng)波長的信號強(qiáng)度確定某種單獨(dú)存在或與其他物質(zhì)混合存在的一種物質(zhì)的含量.
通過測量某一種底物消失或產(chǎn)物出現(xiàn)的量同時間的關(guān)系,追蹤反應(yīng)過程.
分光光度計的具體使用方法:
(1)儀器預(yù)熱。打開樣品室蓋(光門自動關(guān)閉)。開啟電源,指示燈亮,儀器預(yù)熱20 min。選擇開關(guān)置于“T”旋鈕,使數(shù)字顯示為“00.0”。
(2)旋動波長手輪,把所需波長對準(zhǔn)刻度線。
(3)將裝有溶液的比色皿放置比色架中,令參比溶液置于光路。
(4)蓋上樣品室蓋,調(diào)節(jié)透光率“100%T”旋鈕,使數(shù)字顯示為“100.0T”。(如顯示不到100%T,則可加按一次。
(5)吸光度A的測量:儀器調(diào)T為0和100%后,將選擇開關(guān)轉(zhuǎn)換至A調(diào)零旋鈕,數(shù)字顯示應(yīng)為“.000”。然后拉出拉桿,使被測溶液置入光路,數(shù)字顯示值即為試樣的吸光度A。
(6)測定完畢后,先打開樣品室蓋,再斷電源。比色杯應(yīng)清洗干凈后,再貯放保存。